Глава 7, Руководство по биобезопасности: Обеззараживание

Обеззараживание культур и предметов, контаминированных биологическими агентами, в плановом порядке проводится в микробиологических лабораториях. Обеззараживание является жизненно важным компонентом практики микробиологической безопасности и служит для защиты персонала лаборатории (а также других лиц) от инфекции, а также выброса инфекционных организмов во внешнюю среду. Обеззараживание сред, рабочих поверхностей и оборудования также необходимо для предотвращения заражения культивируемых организмов.

Обеззараживание рабочих поверхностей, оборудования, боксов биологической безопасности и других неодушевленных предметов с использованием противомикробных средств называется дезинфекцией. В качестве дезинфицирующих средств используются некоторые химические агенты. Работники лаборатории должны помнить, что все эти химические дезинфицирующие средства таят в себе опасности. Следует свести к минимуму вдыхание и контакт с кожей, избегать попадания в глаза. При работе с этими химикатами всегда следует надевать соответствующие перчатки и защитные очки.

Восприимчивость микробов к химическим дезинфицирующим средствам зависит от их физической структуры и физического состояния (например, более устойчивое состояние спор). Например, восковая внешняя клеточная стенка микобактерий обеспечивает повышенную устойчивость. Вирусы, у которых отсутствуют липиды во внешнем капсиде, делают их более гидрофильными и, как правило, более устойчивыми к химическим дезинфицирующим средствам, чем липофильные вирусы. Порядок устойчивости микробов к химическим дезинфицирующим средствам от наиболее устойчивых к наименее устойчивым представлен на следующей странице.

Ниже приводится список устойчивости микробов к химическим дезинфицирующим средствам, упорядоченный от наиболее устойчивых к наименее устойчивым:

* Адаптировано из книги «Биологическая безопасность: принципы и практика», Флеминг, Д.О. и Хант, Д.Л., ред., 4-е издание (2006 г.), ASM Press, Вашингтон, округ Колумбия.

Соответствующая информация о некоторых распространенных химических дезинфицирующих средствах обобщена в виде таблицы в конце этой главы.

При автоклавировании используется насыщенный пар под давлением (приблизительно 15 фунтов на квадратный дюйм) для достижения температуры в автоклаве не менее 121 ° C (250 ° F). Автоклавирование можно использовать для уничтожения вегетативных бактерий, бактериальных спор и вирусов. При обеззараживании биологически опасных отходов рекомендуется, чтобы температура отходов достигала минимум 115 °C в течение как минимум 20 минут. Общее время обработки, необходимое для соблюдения этих условий, зависит от нескольких факторов нагрузки (см. ниже); однако при обеззараживании биологически опасных отходов необходимо использовать минимальный цикл автоклавирования продолжительностью один час.

Существует три фактора, которые в совокупности определяют эффективность автоклавирования:

Температура: в автоклаве используется пар под давлением примерно 15 фунтов на квадратный дюйм для достижения температуры в камере не менее 121 °C. Хотя температура в камере автоклава может достигать 121 °C, это не обязательно означает, что внутренняя часть загрузки достигнет этой температуры.

Время: для стерилизации чистых предметов обычно рекомендуется минимальное время цикла автоклавирования, составляющее двадцать минут при температуре в камере 121 °C (время начинается не сразу после начала цикла автоклавирования). Однако общее время обработки, необходимое для достижения обеззараживания, зависит от нескольких факторов загрузки, включая загрузочный контейнер (свойства теплопередачи), количество воды, содержащейся в загрузке, и вес загрузки. При повышенных нагрузках требуется более длительное время цикла для обеспечения эффективной дезактивации. Для обработки биологически опасных отходов требуется минимальное время автоклавирования 60 минут. Исключения из минимального 60-минутного времени автоклавирования будут рассматриваться в каждом конкретном случае и должны быть одобрены ответственным за биобезопасность или институциональным комитетом по биобезопасности. Запросы на освобождение должны быть поданы ответственному за биобезопасность вместе с письменной СОП, в которой описываются биологически опасные отходы, условия автоклавирования, время автоклавирования, а также процедура тестирования эффективности автоклава и частота тестирования. Ни в коем случае не допускается время автоклавирования менее 30 минут.

Контакт – насыщение паром необходимо для максимальной теплопередачи. Пар должен контактировать со всеми участками груза. Мешки для автоклава и другие контейнеры следует оставлять частично открытыми (или иным образом допускать доступ пара), чтобы обеспечить достаточный контакт. Исследования показали, что добавление воды внутрь мешка улучшает температурно-временной профиль автоклавного цикла, повышая эффективность стерилизации автоклава.